GDF-8 1mg/vial afavoreix significativament la massa muscular i la millora de la força

Introducció al nucli de GDF-8 1mg/ampolla

Miostatina|Factor de creixement transformador- Membre de la superfamília 1 mg/vial

Nom genèric: miostatina (factor de diferenciació de creixement-8)

Nom anglès: miostatina (factor de diferenciació de creixement 8, GDF-8)

Estructura proteica: Els pèptids madurs són homodímers, amb cada cadena que conté aproximadament 110 aminoàcids.

Pes molecular: Aproximadament 25 kDa (forma monòmera)

Puresa: superior o igual al 90% (SDS-PÀGINA/HPLC)

Contingut: 1 mg/ampolla

Aparença: Pols liofilitzat blanc

Emmagatzematge: Congelar a -80 graus, protegir de la llum i guardar en un lloc sec.

Guia d'ús i emmagatzematge

GDF-8 (miostatina):

El GDF-8, un membre de la superfamília dels factors de creixement transformant-, s'expressa principalment en el múscul esquelètic. Com a regulador negatiu del creixement muscular, controla amb precisió la massa muscular esquelètica unint-se a la via de senyalització del receptor d'activina IIB/ALK4/5, inhibint la proliferació i diferenciació dels mioblasts. Com a proteïna clau de senyalització de retroalimentació negativa per al creixement muscular, té un paper central en els models experimentals de desenvolupament muscular, regeneració, atròfia (com la caquèxia del càncer i la sarcopènia relacionada amb l'edat-) ​​i malalties metabòliques. En comparació amb els factors pro-anabolisme, les seves característiques reguladores negatives proporcionen una perspectiva única per entendre els mecanismes d'equilibri de l'homeòstasi muscular.

A causa del seu paper regulador negatiu crucial en el creixement muscular, el GDF-8 és àmpliament utilitzat pels investigadors en biologia muscular, medicina regenerativa, fisiologia de l'exercici i malalties metabòliques. En comparació amb els models d'eliminació de gens, la seva forma de proteïna recombinant proporciona una eina experimental estandarditzada per controlar amb precisió la intensitat dels senyals inhibidors, estudiar els processos de dosi-resposta i temps in vitro i in vivo. La seva aplicació en estudis de trastorns de la regeneració muscular, models d'atròfia muscular i investigacions metabòliques relacionades amb les interaccions múscul-greix proporciona una base per avaluar possibles estratègies d'intervenció dirigides a la via GDF-8.

Aplicacions GDF-8:

Com a regulador negatiu clàssic del creixement muscular, s'utilitza en models in vitro i in vivo per simular o millorar amb precisió els senyals inhibidors del creixement muscular, estudiant així els seus efectes inhibidors sobre la proliferació, diferenciació, massa muscular esquelètica i funció dels mioblasts. S'utilitza principalment per explorar els mecanismes moleculars de l'atròfia muscular, la regeneració muscular deteriorada i les interaccions entre el múscul i altres teixits (com el greix i l'os).

S'utilitza àmpliament en models d'atròfia muscular, estudis de funció de cèl·lules mioblasts/satèl·lits, experiments de regeneració muscular i investigacions sobre trastorns metabòlics musculars relacionats amb l'obesitat i la diabetis. La seva forma de proteïna recombinant estandarditzada proporciona una eina de recerca bàsica per avaluar nous fàrmacs anti-atròfia muscular, estudiar les bases moleculars de l'adaptació a l'exercici i explorar estratègies terapèutiques dirigides a la senyalització GDF-8.

Mètodes d'ús i emmagatzematge

1. Reconstitució i preparació:

Dissolvent recomanat:

Dissolvent preferit: Diluïu la solució d'àcid acètic amb pH 4,0-5,0 (per exemple, àcid acètic 20 mM).

Portador de claus: Cal afegir la proteïna portadoraal dissolvent i tots els diluents;Es recomana una solució d'àcid acètic estèril que contingui 0,1% d'albúmina sèrica bovina (BSA).

Dilució de la solució de treball: Diluir a pH fisiològic ambPBS estèril o medi de cultiu cel·lular que conté 0,1-1% de BSA.

Absolutament prohibit: Està estrictament prohibit dissoldre o diluir directament la proteïna amb aigua pura, PBS neutre o solucions sense proteïnes portadores.en cas contrari es produirà l'agregació, la precipitació i la inactivació de proteïnes irreversibles.

Procediment estàndard de preparació:

Preparació de dissolvents:

Prepareu una solució d'àcid acètic estèril de 20 mM que conté 0,1% de BSA (o proteïna portadora de puresa superior) i filtreu-la a través d'una membrana de filtre de 0,22 μm.

El dissolvent s'ha de refredar prèviament-amb gel abans d'utilitzar-lo.

Procediment de reconstitució:

Realitzeu el procediment sobre gel. Afegiu 1,0 ml de dissolvent de proteïna transportadora àcida pre-refrigerada a un vial d'1 mg.

Utilitzeu una micropipeta per injectar la mostra molt lentament al llarg de la paret de l'ampolla, evitant la generació de bombolles d'aire o l'impacte directe sobre el pastís liofilitzat-.

Col·loqueu el vial sobre gel iGireu-lo suaument horitzontalment durant 5-10 minutsfins que la pols estigui completament dissolta.No agiteu, agiteu, bufeu o agiteu violentament.

Concentració final: 1 mg/mL (aproximadament 40 μM) solució madre àcida.

Dispensació i gradient de dilució:

Distribuïu immediatament en dosis individuals de 2-10 μL amb tubs de centrífuga silanitzats de baixa adsorció sobre gel.

Quan es dilueix, primer diluïu la solució de reserva àcida almenys 100 vegades amb PBS o medi de cultiu que contingui 0,1-1% de BSA per neutralitzar el pH. Per exemple, agafeu 1 μL de solució d'estoc i afegiu-lo a 99 μL de PBS que contingui 1% de BSA per obtenir una solució intermèdia de 10 ug/mL.

A continuació, la solució intermèdia es dilueix fins a la concentració de treball final. Tots els passos de dilució es realitzen sobre gel.

Etiquetat clarament: GDF-8, concentració, pH, data de preparació, número de lot, temperatura d'emmagatzematge.

Referència de concentració de treball:

Experiments amb cèl·lules in vitro: El rang de concentració que s'utilitza habitualment és de 0,1 a 5 ug/mL (aproximadament de 4 a 200 nM), que s'ha d'optimitzar segons el tipus de cèl·lula i la finalitat experimental.

Experiments in vivo amb animals: La dosi s'ha de determinar estrictament segons el model i la via d'administració (per exemple, intraperitoneal, intramuscular, intravenosa) basant-se en la literatura. L'interval que s'utilitza habitualment està entre ug/kg i mg/kg, is'han de fer experiments preliminars.

Exemple de càlcul: Per preparar una solució de treball de 100 ng/mL, agafeu 1 μL de la solució intermèdia de 10 ug/mL i afegiu-lo a 100 μL de medi de cultiu.

Punts clau a tenir en compte:

Baixa temperatura i suavitat: Tot el procés s'ha de dur a terme sobre gel i els moviments han de ser extremadament suausper evitar la desnaturalització de proteïnes.

Dissolució àcida forçada: S'ha de dissoldre en una solució tampó àcida (pH 4-5), que és crucial per mantenir la seva solubilitat i activitat.

Proteïnes portadores forçades: La dissolució i la dilució s'han de realitzar utilitzant solucions que continguin proteïnes portadores com la BSAper evitar l'adsorció i l'agregació.

Cicle de congelació-estrictament prohibit: Els cicles de congelació-descongelats repetits estan estrictament prohibits; la solució s'ha de dispensar d'una vegada. Solució de treball diluïdano s'han d'emmagatzemar; s'ha de preparar i utilitzar immediatament.

Observació de la condició: Després de la reconstitució, la solució ha de ser clara i lleugerament opalescent. La presència de qualsevol matèria floculent, partícules o terbolesa indica que la proteïna s'ha desnaturalitzat i agregat, i la solució s'ha de descartar.

2. Condicions d'emmagatzematge:

Pols liofilitzat no reconstituït:

Només emmagatzematge: -80 graus (congelació profunda). No emmagatzemar a -20 graus.

Vida útil: 12 mesos a -80 graus .

Protegir estrictament de la llum: Emmagatzemeu-lo a la bossa de paper d'alumini a prova de llum-original amb un dessecant a l'interior.

Solució reconstituïda:

Dispensació immediata:Dispensaciós'ha de completar en 5 minutsdesprés de la reconstitució.

Reenvasat i congelat: Només es pot emmagatzemar a -80 graus, vida útil màxima 2 setmanes, no recomanat per a l'emmagatzematge.

L'emmagatzematge està estrictament prohibit: La solució de treball diluïda ha deno ser emmagatzemati s'ha de mantenir en gel i utilitzar-lo en 4 hores.

Condicions de transport:

S'ha de transportarsotagel seccondicions (-78 graus).

L'envàs ha de tenir suficient gel sec i aïllament per garantir que no es descongeli durant tot el procés.

3. Estàndards d'estabilitat i processament:

Estabilitat fisicoquímica:

És sensible al pH inomés és estable i soluble a pH àcid (4,0-5,0). S'agrega i precipita fàcilment a pH neutre i alcalí.

És extremadament sensible a l'estrès tèrmic i mecànic (vòrtex, oscil·lació, bombolles) i als cicles repetits de congelació{0}}descongelació.

És sensible a l'adsorció superficial, de manera que s'ha d'utilitzar una proteïna portadora i un contenidor de baixa-adsorció.

Manteniment de la bioactivitat:

quatre principis: "dissolució àcida, protecció del portador, suavitat a baixa-temperatura i prohibició estricta dels cicles de congelació-descongelació".

Necessitatqualsevol cosa, poseu-vos en contactenosaltres

Etiquetes populars: gdf-8 1mg/vial promou significativament la millora de la massa muscular i la força, la Xina gdf-8 1mg/vial promou significativament la millora de la massa muscular i la força dels fabricants, proveïdors, fàbrica